高血压、高血脂及高血糖都是影响心脑血管疾病的重要因素,而血小板活化、血管内皮细胞的损伤及血管收缩、舒张调节的异常是这些疾病的病理原因之一。CD62p为血小板a颗粒膜糖蛋白,是血小板活化的灵敏标记物〔1〕;血清内皮素-1(ET-1)主要由内皮细胞产生,是血管内皮细胞损伤的标记物〔2〕,同时也是迄今最强大、持续时间最长的血管收缩肽;降钙素基因相关肽(CGRP)则是作用最强的内源性血管舒张物质〔3〕。我们通过检测高血压、高血脂及糖尿病患者的血小板CD62p及ET-1和CGRP的水平来研究其影响心脑血管疾病的危险性,为临床治疗提供资料。1 对象与方法1.1 对象
高血压患者,31例,年龄51~83岁,无血脂及血糖异常。高血脂患者,53例,其中高胆固醇18例,年龄65~85岁;高甘油三酯35例,年龄73~90岁。糖尿病患者,33例,年龄62~87岁,无高血压及高血脂。高血压并发高血脂患者,25例,年龄67~79岁。高血压并发糖尿病患者,23例,年龄59~80岁。正常人,为健康献血员,30例,年龄18~35岁。1.2 检测方法1.2.1 血小板CD62p:缓慢抽取患者静脉血3 ml,离心取血浆,1∶1加2% 多聚甲醛溶液固定10 min,1 000 r/min离心5 min,沉淀用PBS(0.01 mol/L PB,7.93 g/L NaCl,0.04 g/L KCl)溶解,洗涤离心,最后PBS溶解,调整细胞浓度109/L;取100 μl细胞悬液加20 μl荧光标记CD62p抗体(pharmingen),室温反应30 min,加1 ml PBS振荡洗涤,1 000 r/min离心5 min,加PBS溶解,流式细胞仪检测。1.2.2 ET-1测定:晨空腹抽取静脉血2 ml,加10%EDTA 2 Na 30 μl和抑肽酶40 μl,4℃,3 000 r/min离心10 min,取血浆;用放射免疫试剂盒(北京东亚免疫技术研究所)均相竞争法直接测定ET-1含量。1.2.3 CGRP测定:同上法采集标本,放射免疫试剂盒(北京东亚免疫技术研究所)非平衡法测定CGRP含量。1.3 统计学处理
采用t检验分析。2 结果2.1 血小板CD62p的表达
高血压、高胆固醇、高甘油三酯及糖尿病患者血小板CD62p分别为(52.9±19.4)%、(31.7±21.6)%、(7.4±5.2)%及(11.7±4.4)%,高血压并发高血脂及高血压并发糖尿病者分别为(50.8±22.4)%、(59.1±22.3)%,均较正常人(1.3±0.5)%有显著升高(P顾静雄 李小雯 唐建英 朱晓红临床心血管病杂志 2000 Vol.16 No.8