临床上怀疑急性胆囊炎时，可通过肝胆闪烁扫描和超声波检查确诊。静脉注射标有99m锝的亚氨乙酰乙酸化合物可迅速被肝脏摄取并排泄，应用同位素扫描技术可依次显示肝脏，肝外胆管，胆囊和十二指肠。若肝脏和胆管显影正常而胆囊未显影，往往支持急性胆囊炎的临床诊断，其敏感性可达97%，特异性达90%。假阳性可发生于全胃肠道外营养(TPN)，胰腺炎，危重病或禁食。虽然超声波是诊断胆囊炎较好的方法，但对急性胆囊炎诊断不够精确，证实超声波下的Murphy征，胆囊壁增厚以及胆囊周围积液对诊断有帮助。
当临床表现不典型时，急性胆囊炎的诊断比较困难，必须与胆管炎，胰腺炎，阑尾炎，消化性溃疡和胸膜炎等鉴别。这些疾病都有各自的临床特点，而且肝胆扫描和超声波检查可为急性胆囊炎的诊断提供可靠的证据。
