美国Mayo医院的Toshikazu Yagi等研究人员在深低温保藏过程中对猪肝脏细胞应用了caspase抑制剂--苄氧羰基-缬氨酸-丙氨酸-DL-天门冬酰胺-氟甲基酮(ZVAD-fmk),发现肝细胞的凋亡减少。
深低温保藏的猪肝脏细胞是研究人员利用生物人工肝(BAL)进行代谢功能研究的一个极好模型,但是深低温保藏可能会导致肝细胞存活能力的丧失。这一过程中可能有因caspase激活而导致的细胞凋亡出现。
Toshikazu Yagi等将新近分离出的猪肝脏细胞(存活率为97.4%±0.9%)被分别置于含60μmol/L ZVAD-fmk(+ZVAD组)和无ZVAD-fmk(-ZVAD组)的环境中进行深低温保藏,保藏时间位24到72小时。在解冻并进行了24小时的培养后,研究人员对凋亡性细胞死亡和坏死性细胞死亡的情况进行了观察。结果显示,ZVAD显著降低了深低温保藏后的caspase 3-样活性,同时改善了猪肝脏细胞的存活能力,减少了细胞的凋亡。在ZVAD-fmk溶液中进行深低温保藏的猪肝脏细胞经培养后,其线粒体膜电位(MMP)增高了。
上述结果表明:1)在对猪肝脏细胞进行深低温保藏的过程中发生了caspase 3样蛋白酶的激活以及细胞凋亡;2)在这一过程中出现的线粒体损伤可通过抑制caspase而得到缓解。