，接种该疫苗后产生的抗痘苗病毒抗体可能抑制再次免疫，从而影响了它的免疫治疗效果。重组痘苗病毒疫苗多为活性重组疫苗，具有用量少、抗原不需纯化等优点。用其免疫接种后，重组病毒在体内产生大量抗原，刺激机体产生体液免疫和细胞免疫。同时，病毒载体本身还可发挥佐剂效果。1996年，英国用表达HPV16型和 HPV18型的E6和E7蛋白以及重组痘苗病毒疫苗进行了宫颈癌治疗的一期临床试验，没有发现明显的副作用，在部分受试病人体内可检测到特异性抗体和CTL反应以及细胞因子，其在不同个体中的反应各不相同—— —这主要与癌症病期有关。近年来研制成功的非复制型痘苗病毒载体，除具有痘苗病毒载体的一般优点外，还具有在人体中不能繁殖后代，却 能有效表达外源基因的优点，从而大大减少了免疫缺损病人在“种痘” 后出现并发症的可能性，使该疫苗用于人体更为安全。由于其免疫效果不像活痘苗那样依赖于病毒能否繁殖，因此有可能在一定程度上克服痘苗病毒载体疫苗存在的再次免疫效果不好的问题。用非复制型痘苗病毒载体构建的狂犬疫苗和HIV疫苗在国外也已进入人体试验阶段。我国在 “九五” 期间用非复制型痘苗病毒天坛株载体，成功研制了HPV16非复制型痘苗病毒疫苗。该疫苗在动物实验中被证实具有特异性CTL反应和抗肿瘤移植反应。最近，我国有研究者将HPV16治疗性重组痘苗病毒疫苗与蛋白疫苗联合使用，获得了理想的免疫效果。
多肽疫苗在许多抗原研究中，由CTL识别的抗原决定簇被确定，这为开发多肽疫苗提供了可能。HPV16 型E6、E7多肽在宫颈癌细胞中持续存在，被认为是重要的恶性转化因素。因此，用HPV16型E6或E7多肽免疫，有可能加强肿瘤特异性CTL的产生。目前，人们已经发现了HPV16型 E6、E7抗原中的几个能与人HLA-AⅡ 相配的CTL表位。用HPV型E7多肽疫苗免疫HPV相关肿瘤这一方法，也已进入Ⅰ／Ⅱ期临床试验，试验中未见其有明显副作用。由于多肽疫苗具有易于生产、价廉等优点，因此，多肽疫苗有一定的应用前景。但多肽疫苗由于受MHC- Ⅰ类分子的限制性影响，对于不同遗传背景的个体需要使用与接种对象的HLA相匹配的多肽疫苗。但目前除与人HLA -AⅡ相配的CTL表位外，人们对HPV16型E6、 E7抗原中与其它类型MHC-Ⅰ类分子相结合的CTL表位尚未明了，因此使得多肽疫苗的应用受到较大限制。此外，合成肽疫苗的不足之处还在于其免疫源性不强，大多需要辅以强佐剂才能获得有效免疫反应，这也影响了该疫苗的实际应用。
DNA疫苗DNA疫苗是将插入目的基因的表达质粒导入人体内，通过在人体内表达抗原而引起人体的特异性免疫反应。与其它疫苗相比，DNA 疫苗有许多优点，其中包括可以激发细胞免疫和体液免疫、易于构建和改造、易于制成多价疫苗、不需要佐剂、热稳定性好、成本低廉等。目前，用于研制HPV治疗性DNA疫苗的基因多为HPV16型E 7基因。为了获得更好的免疫效果，可将E7基因进行一些修饰，从而增强MHC-Ⅱ类抗原的呈递，提高细胞介导的免疫应答。动物实验证明，用Sig／E7／LAMP1 融合基因制备的DNA疫苗，比采用野生型E7基因制备的DNA疫苗有更好的抗肿瘤效果。这一经肌肉注射途径免疫的疫苗，其Ⅰ／Ⅱ期临床试验目前正在约翰霍普金斯医院进行。值得指出的是，DNA疫苗在人体中免疫效果弱的问题及安全性问题尚待进一步解决。
我国HPV疫苗的研制已与国际接轨
田厚文主任最后介绍了我国在HPV研究方面的成果。他说，我国在 “九五”期间已将HPV疫苗的研制及应用作为重点攻关课题。经过近5年的研究，我国在HPV疫苗的研制方面已经与国际接轨。在借鉴国外成功经验的同时，我国在这方面的研究也取得了具有自身特色的研究成果。 “九五”期间，在HPV16预防性疫苗的研制方面，我国完成了 HPV16型L1 和L1／L2重组杆状病毒疫苗株的构建，并在昆虫细胞中进行了表达；在电镜下观察到病毒样颗粒的形成；成功地构建了L1／L2均表达的重组复制型和非复制型痘苗病毒疫苗株。在HPV16治疗性疫苗的研制方面，我 国已构建了表达HPV16型E6／E7蛋白的重组复制型和非复制型痘苗病毒疫苗株。经测试，这些疫苗株具有良好的免疫原性，可诱发特异性的CTL 反应，能够保护C57小鼠抵抗TC-1肿瘤细胞的攻击。与对照组相比，接种这种疫苗后，小鼠皮下成瘤时间延迟，荷瘤小鼠生存期明显延长。研究人员用这种HPV治疗性疫苗对肿瘤术后小鼠进行免疫治疗时发现，这种疫苗能有效预防小鼠的肿瘤复发，说明该疫苗可作为HPV16相关肿瘤及癌前病变的免疫治疗候选疫苗。尤其是该疫苗在杀伤肿瘤手术后残余的或已转移的肿瘤细胞上，以及在防止肿瘤转移上具有一定的应用价值。这些研究成果为我国研制基因工程HPV疫苗奠定了基础。
