陕西省人民医院研究人员经过多年攻关,近日在国内首次成功地利用基因技术合成结核分支杆菌TB4抗原。这一成果填补了我国在结核病抗原研究领域的空白,为结核病诊断所用抗原试剂的制备简单化找到新的途径。
据了解,按照传统的方法,结核分支杆菌TB4抗原的制备,要从一种致病很强的结核菌株中提取,既费时、又费事,对试验室工作人员的安全也构成威胁,因此,利用基因技术合成TB4抗原的研究成为一项难题。从90年代初,陕西省人民医院老年病研究中心、病毒研究室研究员陆学东就利用基因技术,对结核分支杆菌抗原成分进行了大量研究。1995年在全国首次找到结核分支杆菌TB4抗原成分,建立了特异性抗体检测方法,并将这一技术应用于结核病的特异性诊断。
从1999年10月开始,在卫生部科学基金的资助下,陆学东领导的课题组进行“结核分支杆菌TB4抗原成分基因工程合成”的研究。他们通过基因组DNA提取,目的基因的确定,DNA序列的确定,PCR引物设计,目的基因的扩增,合成质粒的构建、转导,目的蛋白质的合成鉴定及DNA测序等十大步骤,找到结核杆菌DNA上产生TB4抗原的基因,采用一种特殊的扩增技术,将这段基因大量扩增,并将其转入大肠杆菌质粒中进行大量生产TB4抗原,以获得TB4抗原制作特异性诊断试剂,再用于临床。经过近1年的艰苦攻关,反复实验,终于在9月5日获得成功。