)及34kD抗原等。这些重组抗原的生物学及免疫学特性等有待进一步探讨。
三、重组TP抗原在血清学诊断中的应用
尽管Fujimura等用ELISA检测了不同重组抗原的免疫反应性,发现G17的反应性比M47、S42和G15都高。但近年来的应用研究趋向于将2种或2种以上的重组抗原联合使用,综合两种或多种抗原的不同特性,从而使其具有更高的特异性和敏感性。
(一)15kD与47 kD组合:目前认为15 kD和47 kD是两种抗原性最强的TP蛋白,Zrein等对以重组15 kD和47 kD为抗原的酶免疫试剂盒棗ELISyph-rG的敏感性和特异性进行了评价。在TPHA检测阳性的血清中,其ELISyph-rG结果和TPHA抗体滴度之间的相关性为0.94。在对VDRL方法检测为阴性的1822份正常健康自愿者血清(其中440份血清用TPHA检测为阴性)检测后,结果在这1822份血清中用ELISyph-rG法检测出4份阳性血清。用FTA-ABS和WB法对阳性血清进行进一步确证发现,其敏感性达100%,特异性大于99.8%,认为以重组15 kD和47 kD为抗原的ELISyph-rG法可代替VDRL和TPHA法,适合用于大样本的筛检。
(二)15 kD、17 kD、47 kD组:此3种TP抗原存于梅毒的整个病程中[18],包括晚期稳性梅毒。尤其对于伴有HIV感染的梅毒患者在抗TP的含量低于一般梅毒患者的情况下亦能检测到抗47 kD抗体。Gerber等[3]人对3种重组抗原的联合应用进行了研究,结果表明18例梅毒
患者中,17例患者在整个病程中均可检测到抗体,而42例正常人血清中无1例抗体阳性,提示这种检测方法有很高的敏感性和特异性。Young等[18]对这3种重组蛋白为抗原的酶免疫试剂盒棗ICE Syphilis(immune-capture EIA)进行了评价,并与自然TP为抗原的试剂盒棗Captia SelectSyph-G、TPHA、FTA-ABS及VDRL进行了比较,结果显示ICE Syphilis的特异性明显高于Captia SelectSyph-G(分别为99.8%与99.2%,P〈0.02〉,其敏感性也明显高于Captia SelectSyph-G、FTA-ABS及TPHA(分别为99%~100%,P〈0.01,91.4%~92.4%,92.4%和97.1%〉。在15例伴HIV感染的梅毒患者中,血清ICE Syphilis检测结果均为阳性,而Captia SelectSyph-G检
测结果出现3例阴性。由此可见,ICE Syphilis 检测方法的高特异性及高敏感性将为梅毒的筛检测提供一种理想的手段。
Young等还建立了应用这3种重组蛋白为抗原的快速检测梅毒的胶乳凝集方法棗Syphilis Fast ,并通过检测1518份随机血清标本,对Captia SelectSyph-G和VDRL的特异性进行了比较,以及在99份各期梅毒血清和15例筛检阳性的血清中对其敏感性进行了评价,其特异性(99.8%)明显高于Captia SelectSyyph-G(99.2%)和VDRL(99.1%)(P〈0.02〉,但其敏感性与Captia SelectSyph-G间没显著性差异(分别为93%和92.1%),但这两种方法的敏感性均显著高于VDRL(46.5%)(P〈0.001〉。由此可见,Syphilis Fast法可望成为一种特异性高、检测速度快、操作简便的梅毒筛检方法。
四、展望
Farley 等[20]认为,对有关人群进行梅毒筛检是控制和预防梅毒的重要措施之一。目前常规用于梅毒筛检和诊断的血清学试验主要有两种,一种是对脂类抗原的非螺旋体试验方法(如VDRL、RPR),另一种是特异性梅毒螺旋体试验(如TPHA、FTA-ABS)。前者敏感性和特异性不高,存在着假阳性和假阴性,而后者最大的问题是抗原来源的缺乏,尚未得到解决。因为TP目前还不能人工培养,其用于诊断试验的TP主要通过兔睾丸接种获得,这既需要一定的实验室条件,又费时、费力、
费材料。因此探讨重组TP抗原的梅毒血清学诊断中的应用是制备重组抗原的主要目的之一,重组蛋白的制备使我们能够在实验室里得到不同目的抗原,这一方面为建立现有梅毒血清学诊断的替代方法提供了条件,同时又为建立特异性和敏感性更高的诊断新方法奠定了基础,如通过重组抗原制备单克隆抗体,以建立检测梅毒抗原的方法,将为神经梅毒、早期隐性梅毒的实验室诊断提供新的手段。同时通过对不同重组抗原的结构,以及生物学和免疫学的分析,可以达到筛选TP致病因子和开发
TP疫苗的目的,为TP的预防和治疗提供更加有效的手段。